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膠原酶I的化學本質及使用
膠原酶的化學名為膠原蛋白水解酶(Collagenase)，它能在生理PH和溫度條件下特異性地水解天然膠原蛋白的三維螺旋結構，而不損傷其它蛋白質和組織。膠原酶I的化學本質是一種蛋白酶，它能夠特異性的結合Pro-X-Glyc-Pro序列中，中性氨基酸(X)和甘氨酸之間的肽鍵。該序列高頻率的存在於膠原中。膠原酶是*的一種可以降解廣泛存在於結締組織中的具有三股螺旋的天然膠原纖維的蛋白酶。但同時，這對溫度、PH和導致蛋白質變性的各種因素均非常敏感，極易受到外界條件的影響而改變其本身的構...
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2015-03-09
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CCK8試劑盒日本同仁常見問題解答(二)
上篇文章，我們已經介紹了一部分CCK8試劑盒日本同仁的常見問題，本文將繼續為大家講解。1、實驗之前，是否需要先檢測一下培養基和CCK-8是否會反應?建議使用一個孔作一下檢測，因為有培養基中可能含有氧化還原反應的物質，在正式實驗之前有必要先確認培養基和CCK-8是否反應。一般正常在的OD值應該在0.4以下。2、如果加入的藥物中含有金屬，是否會有影響?金屬對CCK-8顯色有影響。當終濃度為1Mm的氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅會抑製5%、15%、90%的顯色反應，使靈敏度降級。如果終濃...
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2015-03-02
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CCK8試劑盒日本同仁常見問題解答(一)
CCK8試劑盒日本同仁是常用的試劑盒之一，很多客戶在使用時都會有一些疑問，北京沃比森整理總結一些常見的問題，希望給大家一些參考和借鑒。1、一個孔中應接種多少個細胞?當使用標準96孔板時，貼壁細胞的zui小接種量至少為1,000個/孔(100μl培養基)。檢測白細胞時的靈敏度相對較低，因此推薦接種量不低於2,500個/孔(100μl培養基)。如果要使用24孔板或6孔板實驗，請先計算每孔相應的接種量，並按照每孔培養基總體積的10%加入CCK-8溶液。2、CCK8試劑盒日本同仁能否...
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2015-01-27
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GelRed核酸染料的產品特性
GelRed核酸染料產品特性：1.高靈敏度GelRed和GelGreen是目前市場中zui靈敏的凝膠核酸染料2.GelRed核酸染料更安全艾姆斯氏試驗結果表明，該染料的誘變性遠小於溴化乙錠(EB)3.穩定性*可以使用微波爐加熱，可以在室溫下保存4.信噪比高樣品熒光信號強，背景信號低。5.GelRed核酸染料有廣泛的適應性適用於預製凝膠和凝膠電泳後染色6.染色過程簡單與EB一樣，在預製膠和電泳過程中不必擔心染料降解;而電泳後染色過程也隻需30分鍾且無需脫色或衝洗，即可直接用紫外...
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2015-01-21
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脂質體2000轉染DNA的操作過程
脂質體2000適用於把DNA轉染入懸浮或貼壁培養細胞中，是目前條件下zui方便的轉染方法之一。轉染率高，優於磷酸鈣法，比它高5~100倍，能把DNA和RNA轉染到各種細胞。用脂質體2000進行轉染時，首先需優化轉染條件，應找出該批LR對轉染某一特定細胞適合的用量、作用時間等，對每批LR都要做：先要固定一個DNA的量和DNA/LR混合物與細胞相互作用的時間，DNA可從1~5μg和孵育時間6小時開始，按這兩個參數繪出相應LR需用量的曲線，再選用LR和DNA兩者*的劑量，確定出轉染...
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2015-01-13
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HyClone胎牛血清培養平滑肌細胞的兩種方法
HyClone胎牛血清培養血管平滑肌細胞常用的方法有貼塊法(explant)和酶解離法(enzymedisperse)。下麵一起來看下這兩種方法。1、貼塊法方法：動物經頸動脈放血後，在無菌操作下迅速取出胸腹主動脈段，置於含Hank's液的平皿中漂洗3次，將凝塊洗幹淨後剝除外膜的纖維脂肪層，然後縱行切開血管，刮除內膜即內皮細胞迅速撕下中膜內、中層，切成約1mm寬的小條，浸泡在含血清的Hank's液中，並將撕下小組織塊種植於培養瓶壁。置於37℃恒溫箱，2h左右，取出培養瓶加入20...
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2015-01-06
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