GelRed核酸染料的高靈敏度和安全性

 　　GelRed核酸染料是集高靈敏、低毒性和超穩定於一身的的熒光核酸凝膠染色試劑。其水溶染色劑通過美國環保局安全認定，廢棄物可直接倒入下水道，而不會造成任何環境汙染。

　　GelRed核酸染料無論用於(yu) 預製凝膠染色還是凝膠電泳後染色，都表現出了*的靈敏度。為(wei) 配合 312 nm UV 凝膠成像係統而設計的 GelRed ，在使用了我們(men) 新開發的具有的試驗步驟後(該試驗步驟中使用稀釋的 NaCl 溶液替代傳(chuan) 統的 TBE 緩衝(chong) 溶液)，在凝膠電泳後染色中優(you) 於(yu) 或者至少相當於(yu) SYBR Gold 。但與(yu) SYBR Gold 不同， GelRed核酸染料在預製凝膠中使用時仍然有*的靈敏度，事實上GelRed 在檢測低濃度、微量 DNA 方麵比 EB 表現出更高的靈敏度，尤其對小分子量的 DNA 檢測非常靈敏。

　　GelRed核酸染料可以滿足使用 488 nm 激光凝膠掃描儀(yi) 或者可見光激發的 Dark Reader 的研究人員的使用要求。 GelGreen 無論是在預製凝膠還是凝膠電泳後染色中都與(yu) SYBR Green I 靈敏度相當，但不存在後者的不穩定性問題。實際上， GelRed核酸染料，特別是 GelRed 非常穩定，可以長期在室溫下保存。當這兩(liang) 種染料稀釋在 TBE 或者類似的電泳緩衝(chong) 溶液中時甚至可以使用微波爐加熱，便於(yu) 采用常規方法製備預製凝膠。含有染料的預製凝膠可以成批製備，長期保存。

　　同樣重要的是， GelRed核酸染料相比 EB 或 SYBR Green I 提高了安全性。 獨立的測試服務公司( Litron Laboratories, Inc. )進行的標準艾姆斯氏測試結果表明， 在 18.5 μ g /mL (該濃度遠高於(yu) 推薦用於(yu) 電泳後染色的 約 4 μ g/mL 的 3X 染色液 )濃度下， GelGreen 沒有誘變性，而 GelRed 也僅(jin) 在 S9 代謝活化時有微弱的誘變性。 GelRed 和 GelGreen 的特殊化學結構使其難以穿透細胞膜進入細胞，正是這一特性降低了染料的細胞毒性。相反， SYBR Green I 廣泛地用於(yu) 活細胞線粒體(ti) 和核 DNA 染色，這正是由於(yu) 它能快速的被細胞吞入。由於(yu) 已知 SYBR Green I 對紫外線導致的突變有強烈的增強作用，因此它的高細胞膜透性使它在紫外環境觀察時成為(wei) 凝膠染色的主要有害物質。

　　GelRed核酸染料的使用方法

　　將100ml瓊脂糖凝膠溶液(濃度一般為(wei) 0.8%~2%)在微波爐中融化。

　　加入5-10µl GelRed核酸染料(如果背景過高可以適當減少用量，如果敏感度過低，可以適當增加用量)，輕輕搖勻，避免產(chan) 生氣泡。

　　冷卻至不燙手時倒膠，待瓊脂糖凝膠*凝固後上樣電泳。

　　電泳完畢在紫外燈下觀察。若使用數碼相機照像記錄，則關(guan) 閉相機的閃光燈，放在自動檔即可;若使用凝膠成像係統照相，通過調節光圈、曝光時間，選擇合適的濾光片，可得到成像清晰、背景較低的照片。

　　GelRed核酸染料使用時的注意事項

　　1. 膠厚度不宜超過0.5cm，膠太厚會(hui) 影響檢測的靈敏度。加入GoldenView的瓊脂糖凝膠反複融化可能會(hui) 對核酸檢測的靈敏度產(chan) 生一定影響，但不明顯。通過凝膠電泳回收DNA片段時，建議使用GelRed核酸染料染色，在自然光下切割DNA條帶，避免紫外線與(yu) EB對目的DNA產(chan) 生的損傷(shang) ，可明顯提高克隆、轉化、轉錄等分子生物學下遊操作的效率。

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