了解這些使用GelRed核酸染料更加得心應手

 　　GelRed核酸染料是一種可以替代溴化乙錠(EB)的紅色熒光核酸染色劑。由Biotium公司研發推出的EB替代染料，染色效果和EB差不多，在紫外下不容易淬滅，可以用於膠回收。但價格較貴。

　　GelRed核酸染料是一種集高靈敏、低毒性和超穩定性於(yu) 一身的的熒光核酸凝膠染色試劑。其水溶染色劑通過美國環保局安全認定，廢棄物可直接倒入下水道，而不會(hui) 造成任何環境汙染。其特點有：

　　1)高靈敏度：GelRed 和 GelGreen 是目前市場中zui靈敏的凝膠核酸染料之一;

　　2)穩定性*：可以使用微波爐加熱，可以在室溫下保存;

　　3)廣泛的適應性：適用於(yu) 預製凝膠和凝膠電泳後染色;

　　4)更安全：艾姆斯氏試驗結果表明，該染料的誘變性遠小於(yu) 溴化乙錠(EB);

　　5)染色過程簡單：與(yu) EB一樣，在預製膠和電泳過程中不必擔心染料降解;而電泳後染色過程也隻需30分鍾且無需脫色或衝(chong) 洗;

　　6)對 DNA 和 RNA 的遷移影響小：對核酸遷移的影響小於(yu) SYBR Green I?;

　　7)與(yu) 標準凝膠成像係統以及可見光激發的凝膠觀察裝置兼容：使用 312nm 激發的 UV 凝膠成像係統時，GelRed 可以的替代EB;使用 254nm 激發的 UV 凝膠成像係統或可見光激發的凝膠觀察裝置時，GelGreen 足以替代任意一種 SYB染料。但該染料會(hui) 使小片段DNA遷移慢一些(與(yu) EB相比)。

　　GelRed核酸染料的貯存：室溫避光保存一年;4℃避光保存三年。

　　GelRed核酸染料的使用方法：

　　一、GelRed預染方法

　　1.將GelRed試劑按1:10000溶於(yu) 瓊脂糖凝膠溶液中，充分混勻。(例如：將5ul GelRed 試劑加入到50ml 凝膠溶液中)。注：由於(yu) GelRed 具有出色的熱穩定性，可將試劑直接加入高溫的凝膠溶液中，而不用等凝膠溶液冷卻後再加入。

　　2.澆製凝膠並使其凝固後上樣電泳。注意：使用這種預先加入染色劑的瓊脂糖凝膠，每次不易加入太多的 DNA 樣品，否則容易造成飽和現象，可以做多個(ge) 不同濃度的 DNA Marker，以確定* DNA 上樣量。

　　3.紫外下觀察結果。注：如果始終出現拖尾或是條帶無法分離的現象，您可以使用後染法對DNA染色，以確認問題是否與(yu) 染色劑有關(guan) 。如果使用後染法問題依舊存在，則說明問題與(yu) 染色劑無關(guan) ，請嚐試減少核酸的上樣量後進行電泳。

　　二、GelRed後染方法

　　1.用H2O將GelRed稀釋約3300倍到0.1M Nacl中，製成3X染色溶液。(例如：將15 μl GelRed和5ml的1M NaCl加入到45ml H2O中)。注：GelRed 1X染色溶液同樣可用於(yu) 後染，但其靈敏度要低於(yu) 3X染色溶液。

　　2.將凝膠小心地放入合適的容器中，如聚丙烯容器中。緩慢加入足量的3X染色溶液浸沒凝膠。

　　3.在室溫下輕輕地搖動凝膠板，*的染膠時間為(wei) 30 分鍾，這取決(jue) 於(yu) 凝膠板的厚度、瓊脂糖或聚丙烯酰胺的濃度和 DNA 的長短。凝膠越厚或瓊脂糖的濃度越高，染色所需要的時間就越長。注：染色溶液至少可重複使用2-3次。如果不是立即再用的話，建議將用過的染色溶液冷藏保存。

　　4.紫外下觀察結果。

　　注意：GelRed核酸染料使用前應在室溫下*融化混勻後使用。

　　了解以上內(nei) 容，對我們(men) 使用GelRed核酸染料很有幫助，讓我們(men) 使用GelRed核酸染料更加得心應手。