HyClone胎牛血清是常見的實驗室培養(yang) 基營養(yang) 液,在大部分試驗中是不需要對HyClone胎牛血清中的脂肪酸進行去除的,但是,在進行某些特殊細胞培養(yang) 的時候為(wei) 了保證實驗的準確性和我們(men) 要讀胎牛血清中的某些成分進行去除,常見的脂肪酸去除,我們(men) 一般用一下方法。
1.溶解。取適量的胎牛血清白蛋白提取物,溶解於(yu) 10倍的蒸餾水中,溶解溫度在23~27℃。 用濃度為(wei) 0.2N的HCl,調節PH至3~3.5。
2.解析。充分溶解後的溶液胎牛血清白蛋白移至冰水混合物中進行冰水浴,同時持續攪拌,維持30min。
3.吸附。加入5%的活性炭,混勻,混懸液將混懸液移至冰水混合物中進行冰水浴,同時持續攪拌,維持1小時。過濾,濾渣回收後再利用。
4.濃縮。 濾液用0.2N的NaOH調節PH值至7.0,然後用20000分子量以下的超濾器進行超濾濃縮。
5.凍幹。將濃縮液按凍幹曲線凍幹,即將超濾後的濃縮液迅速冷凍至-40℃,持續1小時左右,升到-25℃,持續10~20小時,再緩慢升溫至0℃,維持1~4小時,升溫至保存溫度20℃,分裝為(wei) 成品。