1、細胞生長速度緩慢,長滿單層時間長;從(cong) 同一細胞瓶中分出兩(liang) 瓶細胞,用同一種培養(yang) 液,分別加入10%的對照血清和待檢血清,在相同條件下培養(yang) 72小時,會(hui) 出現對照血清長滿單層,而待檢血清大約隻有60~70%,這種血清就不適合用來大規模培養(yang) 細胞。
2、細胞傳(chuan) 代後形態不正常,細胞狀態發生變化 ;由於(yu) 血清的質量問題,使原本狀態正常的細胞經傳(chuan) 代後形態會(hui) 變差;
比如:細胞瓶裏會(hui) 出現一些蠕動的小黑點(並非汙染),或者細胞表麵形成一層油狀覆蓋物;細胞的輪廓變得模糊,細胞之間的間隙被血清中的蛋白顆粒填充,從(cong) 而影響細胞向四周擴展生長。
3、細胞傳(chuan) 幾代後就出現脫壁現象,不能連續傳(chuan) 代 ;質量較差的血清缺乏某種細胞的貼壁因子,會(hui) 使細胞在傳(chuan) 代過程中逐漸喪(sang) 失貼壁的能力。細胞會(hui) 從(cong) 正常的貼壁狀態,邊緣開始萎縮,上翹。觀察到的現象就是細胞表麵不光滑,晃動細胞瓶會(hui) 看到細胞表麵有絮狀物隨培養(yang) 液波動。隨著傳(chuan) 代次數增加,細胞萎縮的情況越來越嚴(yan) 重,直到終*脫壁而死亡。
4、細胞長的很好,致密的單層,狀態也很正常,但是接毒後細胞基本不發生病變,做滴度檢測幾乎測不出抗原滴度。這種情況也許是因為(wei) HyClone胎牛血清中含有與(yu) 接種的病毒有同源的特異性抗體(ti) 。
比如HyClone胎牛血清中經常會(hui) 存在乙腦抗體(ti) ,牛腹瀉病毒抗體(ti) 等,如果存在這些抗體(ti) ,就會(hui) 把接進去的病毒給中和掉。如果抗體(ti) 滴度很高,病毒會(hui) 被抗體(ti) *中和,就沒有病毒顆粒在細胞中增殖,所以會(hui) 檢測不到病毒滴度。
這種情況給疫苗企業(ye) 造成的損失是相當大的,不產(chan) 毒等於(yu) 前麵所做的那麽(me) 多工作全部白費,浪費人力、物力,尤其是時間上的浪費,從(cong) 培養(yang) 細胞開始到接病毒,到收液至少需要一兩(liang) 個(ge) 月,一旦出現不產(chan) 毒的情況,那麽(me) 這一兩(liang) 月時間就白白浪費掉了,這也是HyClone胎牛血清給疫苗企業(ye) 造成的風險之一。
5、細胞生長的狀態一般,產(chan) 毒少,毒價(jia) 低。這種情況比較常見,細胞是病毒的載體(ti) ,由於(yu) HyClone胎牛血清質量不好,導致細胞生長狀態不好,病毒就無法進行正常的複製。並非所有病毒都不能複製,所以就造成疫苗的效價(jia) 不夠,可能造成不合格產(chan) 品。