科普一下葡聚糖凝膠的手工操作使用方法

 　　科普一下葡聚糖凝膠的手工操作使用方法

　　一般剛拿到手的葡聚糖凝膠為(wei) 幹粉顆粒。用前，可以用20倍體(ti) 積的雙蒸水泡過夜。或者沸水煮2-4個(ge) 小時。記得補水。這樣Sephadex G/葡聚糖凝膠基本就泡好了。

　　膠泡好後，將柱子準備好(下篩板裝好)，先用水衝(chong) 洗兩(liang) 次。將凝膠混勻(凝膠濃度要適當，太稀會(hui) 灌得很慢，而太濃的話容易產(chan) 生氣泡，一般1體(ti) 積的膠，2-3體(ti) 積的水就可以)，輕輕倒入柱中，等柱中液麵下降一些後，立刻補加，等膠體(ti) 積灌得差不多時，靜置，讓膠*沉下後，再小心安置上篩板(上篩板不太好安，但多安幾次還是能夠安好的。可以先裝上篩板浸濕，輕輕斜蓋在上口，用吸頭壓入，關(guan) 鍵是不能把氣泡擠入。再蓋平，此時如果篩板上有小量的膠，可以加水混勻再吸走)。此時不停的加水或者其他的緩衝(chong) 液，不能讓柱子幹了，如果幹了，前麵的工作就前功盡棄了，得重新灌了。

　　如果有條件，可以用藍色葡聚糖(1mg/ml)檢測一下柱子是否灌得均勻。檢測方法與(yu) 樣品的過柱方法相同。

　　檢測合格後，就可以上樣了。樣品保證沒有沉澱，如果有的話，可以離心或者過濾去除。

　　等上篩板上的液體(ti) 流完，將合適的樣品量(不超過柱體(ti) 積的1/10為(wei) 好)全倍加入，自然流幹。再加少量緩衝(chong) 液，如0.5ml或者1ml，等流完再加少量緩衝(chong) 液，如此三次後，就可以多加，或者一直加懣到柱口。

　　如果下麵接了檢測器的話就好辦，如果沒有檢測器，而目標樣品有顏色，也比較好收集，如果又沒有檢測器，又沒有顏色，可能得分段收集了，這個(ge) 誰也偷不得懶。

　　等樣品收集完，就是衝(chong) 上20倍柱體(ti) 積的緩衝(chong) 液或者水，讓小分子物質也流出來，柱子得到再生(這個(ge) 可以反向衝(chong) 洗，也就是將柱子倒過來，從(cong) 出口加入緩衝(chong) 液，這個(ge) 可以接一個(ge) 合適的軟管，用一個(ge) 橈杯接了水放到高處，利用重力自然往下流)。