不同種類的微生物對營養物質的需求各不相同,因此需要選擇適合的
TC-100培養基來滿足它們的生長需求。例如,細菌通常需要碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類物質,pH值對微生物的生長有影響。適宜的pH值可以促進微生物的生長繁殖,而不適宜的pH值則可能抑製或阻止其生長。因此,在配製時,需要根據微生物的種類和要求,調節pH值。
TC-100培養基的測定步驟:
-目標菌:用少量目標菌的培養物,接種到測試肉湯和參考肉湯中,混勻。
-非目標菌:用大量非目標菌培養物接種到測試肉湯和參考肉湯中,混勻。
-將接種好的培養基放置在恒溫搖床或培養箱中進行培養。培養時間根據微生物的生長速度而定,一般為24小時至72小時。
-必要時可取原菌液的稀釋液,塗布於非選擇性瓊脂平板上。
-根據不同的測試目的進行計算和解釋。目標菌的PR(回收率)不應小於0.1(即測試培養基和參考培養基菌落總數的差別不超過一個數量級);非目標菌的SF(選擇性因子)值至少應達到2。
-混合菌的接種:在測試肉湯中接種10CFU-100CFU的目標菌和>1000CFU的非目標菌,混勻。
-在規定的時間和溫度下進行培養。用3mm接種環取一環混合菌培養液劃線接種到特定目標菌選擇性平板上,取一環非目標菌培養液劃線接種到非選擇性平板上。
-將兩種平板在規定條件下培養。結果判定:選擇性平板上有至少10個目標菌生長,表示測試肉湯的生長率良好;非選擇性平板上沒有菌生長或少於10個菌,則表示測試肉湯的選擇性良好。