品牌 | CellWorld | 貨號 | C0260-117 |
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規格 | 1ml | 供貨周期 | 現貨 |
主要用途 | 實驗 | 應用領域 | 生物產業 |
Hoechst 33342 染色液
產(chan) 品簡介:
Hoechst 33342/PI 雙染試劑盒(Hoechst 33342/PI Double Stain Kit)采用Hoechst 33342和碘化丙啶(PI)雙染的方法以區分凋亡細胞和壞死細胞的試劑盒。其檢測原理是:細胞核熒光染料Hoechst 33342可以穿透細胞膜,嵌入雙鏈DNA後釋放藍色熒光。對於(yu) 正常細胞,其可少許進入細胞膜使其染上低藍色。而凋亡細胞由於(yu) 細胞膜通透性增強,從(cong) 而使得進入凋亡細胞內(nei) 的Hoechst 33342明顯多於(yu) 正常細胞,熒光強度比正常細胞要高。另外,細胞發生凋亡時染色質會(hui) 固縮,從(cong) 而使得染料能更有效和聚集的結合於(yu) DNA,並且凋亡細胞膜上的p-糖蛋白泵功能受損而不能有效的將Hoechst 33342排除到細胞外使其在細胞內(nei) 的積累增加,這些特征都使得凋亡細胞經染色後熒光會(hui) 比正常細胞明顯增強。但細胞核熒光染料PI不能穿透細胞膜完整的正常細胞或凋亡細胞,即活細胞對PI染料拒染。而對於(yu) 壞死細胞,其細胞膜的完整性在早期即已喪(sang) 失,可被PI染色。
產(chan) 品描述:
本產(chan) 品為(wei) 液體(ti) (1X)染色液,已經過 0.1μm過濾,不含細菌、支原體(ti) 等。
濃度:1mg/mL
規格: 1ml/支
有效期: 12個(ge) 月
儲(chu) 存溫度: -20℃
運輸條件:低溫運輸
使用說明
Hoechst 33342 使用介紹:
※ Hoechst 33342也被稱為(wei) :bisBenzimide H33342 或者 HOE33342。
※ Hoechst 33342 是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料產(chan) 品,對細胞的毒性相對較低。
※ Hoechst 33342 染色經常用在細胞凋亡檢測過程中使用,染色後可采用熒光顯微鏡進行觀察或采用流式細胞儀(yi) 檢測。Hoechst 33342 也可用於(yu) 普通細胞核染色使用或DNA染色過程使用。
※ Hoechst 33342 的最大激發波長:346nm,最大發射波長:460nm;Hoechst 33342 和 雙鏈DNA進行結合後的最大激發波長:350nm,最大發射波長:461nm。
※ Hoechst 33342可溶於(yu) 水,溶解度可以達到 20mg/ml。
※ 用於(yu) 細胞核染色過程時,Hoechst 33342的工作濃度是:0.5-10ug/ml。Hoechst 33342 熒光染料能少許進入細胞膜中,使喜寶媽們(men) 染上低藍色,然而 凋亡細胞膜通透性增強,所以進入凋亡細胞的 Hoechst 33342 要比正常細胞的量大,凋亡細胞熒光強度要比正常細胞的高,除此之外,凋亡細胞的染色體(ti) DNA 結構發生改變後,使該染料可以更有效的與(yu) DNA 進行結合,且凋亡細胞膜上的 p-糖蛋白泵功能受到損傷(shang) 後不可以有效的將 Hoechst 33342 排出到細胞外,使之在細胞內(nei) 積累增加,都會(hui) 讓凋亡細胞的藍色熒光增強。然而 PI染料 是不能進入到細胞膜完整的正常細胞以及凋亡細胞中,所以活細胞對 PI染料拒染,但壞死細胞由於(yu) 膜完整性在早期已經被破損,所以是可以被PI染料進行染色的。根據以上特性,用 Hoechst 33342 結合 PI染料對凋亡細胞進行雙染色,就可以在流式細胞儀(yi) 上將正常細胞、凋亡細胞以及壞死細胞進行區別來。
※ 在雙變量流式細胞儀(yi) 散點圖上,這三群細胞分別表現為(wei) :正常細胞為(wei) 低藍色/低紅色(Hoechst 33342+/PI+),凋亡細胞為(wei) 高藍色/低紅色(Hoechst 33342++/PI+),壞死細胞為(wei) 低藍色/高紅色(Hoechst 33342+/PI++)。
注意事項
1. 實驗前需戴好防護眼鏡,穿戴防護服和口罩,佩戴手套,避免與(yu) 皮膚接觸。
2. 實驗過程中如遇到有毒或者刺激性物質及有害物質產(chan) 生,必要時實驗操作需要手套箱內(nei) 完成以免對實驗人員造成傷(shang) 害。
3. 取樣品的移液槍頭需及時更換,必要時為(wei) 避免交叉汙染盡可能選擇濾芯吸頭。
4. 稱量藥品時選用稱量紙,並無風處取藥和稱量以免揚撒,試劑的容器使用前務必確保幹淨,並消毒。
5. 取藥品時盡量采用多個(ge) 藥勺分別使用,使用後清洗幹淨後,烘幹消毒存放。
6. 實驗後產(chan) 生的廢棄物需分類存儲(chu) ,並交於(yu) 專(zhuan) 業(ye) 生物廢氣物處理公司處理,以免造成環境汙染。
購買(mai) 說明
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